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代謝組學文獻分享—研究背景近幾年代謝組學的研究如火如荼的開展，極大地促進了各學科的發展，如疾病診斷與治療、營養學、環境毒理學、進化和發育及藥物等；與此同時，質譜成像技術（mass spectrometry imaging, MSI）結合質譜分析和影像可視化，憑借其樣本處理簡單、能反應多種分子在空間上的分布及分子結構信息而受到高度的關注；尤其2004年Cooks等[1]將ESI源去掉封閉外殼，開發了常壓敞開式解析電噴霧離子化（DESI）技術并成功用于質譜成像分析，更促進了MSI在臨床醫學、藥學和植物學等領域的應用[2]。代謝組學文獻分享，隨后，空間代謝組學（Spatial Metabolomics）也應運而生，它將組學信息擴展到了二維乃至三維的水平，研究小分子在組織切片中的空間分布，告訴我們變化“在哪里發生”，從而極大拓展了人們對組學樣品信息的認知[3-4]。由于DESI等離子化技術需要被測樣品與采樣錐孔之間非常近，才能保證足夠高的靈敏度，而對于較大的組織樣品，無法將樣本放進離子化探針所在位置，難以將離子有效傳輸到質譜分析器進行高靈敏分析。代謝組學文獻分享，鑒于此，藥物所“天然藥物活性物質與功能國家重點實驗室”再帕爾•阿不力孜教授課題組主導研發了新型敞開式空氣動力輔助離子化（Airflow-assisted desorption electrospray ionization，AFADESI）及其質譜成像技術（AFADESI-MSI）技術，借助0.5米或更長的傳輸管，實現了遠距離離子傳輸，放置樣品的空間非常充裕，且可輕松調整位置（圖1），并將該技術用于整體大鼠體內藥物成像分析[5-6]和腫瘤生物標志物的原位篩查及免標記分子病理診斷的研究[7-8]。圖1 AFADESI-IMS系統[5]近期，再帕爾·阿不力孜教授又將AFADESI-MSI技術與傳統免疫組織化學技術（Immunohistochemistry，IHC）進行結合，對256個患有食管鱗狀細胞癌（esophageal squamous cell carcinoma，ESCC）的病人的樣品進行組織空間特異性的代謝組學分析，實現了對腫瘤相關的代謝物和代謝酶進行高通量分析，并將其研究成果發表在PNAS上[9]。本期文獻分享Spatially resolved metabolomics to discover tumor-associated metabolic alterations. Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 2019 01 02;116(1)Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 2019 01 02;116(1). IF=9.580代謝組學文獻分享—技術路線為實現高通量原位檢測與腫瘤相關的代謝物和代謝酶，課題組首先利用AFADESI-MSI技術獲取不同組織（根據細胞類型和組成分為：癌癥組織、上皮組織和肌肉組織）空間特定區域的代謝物輪廓，再結合PLS-DA模型獲得ESCC和正常組織間的差異代謝物，隨后通過代謝通路分析選出可能與ESCC相關的酶；最后通過IHC技術用癌旁組織對與ESCC相關的酶進樣驗證（圖2）。圖2 技術路線代謝組學文獻分享—結果通過該技術，能明顯發現甘油磷脂、葡萄糖酸、嘧啶、組氨酸、脂肪酸、精胺和脯氨酸在癌癥組織和正常組織中表達量的差異（圖3）。圖3 ESCC組織區域特異性空間分布圖進一步的通路分析表明，脯氨酸合成、組氨酸代謝、谷氨酰胺代謝和脂肪酸合成等代謝通路在ESCC患者中發生改變，最后通過IHC驗證發現吡咯啉-5-羧酸還原酶2（PYCR2）、谷氨酰胺酶（GLS）、鳥苷磷酸化酶（UPase1）、組氨酸脫羧酶（HDC）、脂肪酸合成酶（FASN）和鳥氨酸脫羧酶（ODC）在癌癥組織中發生了紊亂，尤其是PYCR2和UPase1首次發現在ESCC中異常表達（圖4）。圖4 谷氨酰胺代謝通路中代謝物和酶的空間分布圖代謝組學文獻分享，最后，課題組又用36個新收集的樣本進樣驗證，發現模型的準確率達到94.4%，且篩選的差異代謝物在不同組織樣本上的分布仍有較高的特異性。結論據報道[10]，AFADESI-MSI的檢測靈敏度達到pg級水平，含量動態范圍跨越3個數量級，能檢測出1500多個代謝物，同時也能精確表征與識別代謝物在組織亞區域的分布特征；而本文將其與IHC方法結合，為研究癌癥的發病機制提供了代謝水平的分子依據，并為癌癥的診療干預提供了新的潛在靶點。代謝組學文獻分享，隨著質譜成像技術、質譜成像可視化處理及定量等關鍵技術的不斷突破，以MSI技術為基礎的“空間代謝組學”也能為大家的研究提供新思路和新視角。...
背景資料人絨毛膜促性腺激素 (Human Chorionic Gonadotropin，HCG) 是由胎盤的滋養層細胞分泌的一種糖蛋白，由α和β兩個亞基組成的異源二聚體。α亞基與垂體分泌的黃體生產素 (LH)、促卵泡激素 (FSH)和促甲狀腺激素 (TSH)相似，β-亞基是HCG所特異的結構。HCG的主要功能是刺激黃體，有利于雌激素和黃體酮的持續分泌，促進子宮蛻膜的形成，使胎盤生長成熟。受精卵在子宮內著床后，由胚胎發育為胎兒的過程中，胎盤的滋養層細胞產生大量的HCG，HCG可通過血液循環排泄到尿液中，所以早期妊娠可以通過血液、尿液檢測HCG。妊娠不同時期的HCG水平存在較大差異，一般非孕婦的血HCG＜100mIU/mL，尿HCG＜25mIU/mL。一般情況下，受精后第六日，受精卵滋養層形成，便開始分泌少量HCG。妊娠早期HCG分泌量增長快，約2日增長一倍，至妊娠8-10周血清HCG濃度達到峰值，在幾萬mIU/mL以上，持續1-2周后迅速降低，僅為峰值的10％-20％并維持至分娩。一般尿HCG檢測多為定性，在月經推遲7-10天以上進行檢測。血HCG檢測多為定量，在同房7-10天即可進行檢測。因此，血HCG檢測可更早判定有無懷孕。當異位妊娠、監控婦女流產以及監測對腫瘤患者的治療情況或檢測復發時，一般需要進行血HCG的檢測，而尿 HCG 則無法達到效果。因此，血液HCG更加準確。 臨床意義HCG的檢查對早期妊娠診斷，異位妊娠、滋養細胞腫瘤等疾病的診療具有重要意義。(1)早期妊娠的診斷：多胎妊娠者尿HCG常高于單胎妊娠，常用的檢查方法均可顯示陽性結果。(2)異位妊娠的診斷：正常妊娠時血清HCG水平隨著不同孕周呈現規律性變化，而異位妊娠時HCG含量比正常妊娠時明顯降低，檢測血清HCG有助于明確診斷。(3)流產的診斷：先兆流產、不完全流產HCG呈陽性；完全流產或死胎時HCG由陽性轉為陰性。人工流產后HCG仍呈陽性，提示宮腔內殘留有胚胎組織。(4)滋養層細胞疾病的診斷：因葡萄胎、惡性葡萄胎、絨毛膜上皮癌等滋養細胞高度增生，血清及尿液HCG明顯增高。(5)腫瘤標志物：男性HCG升高可見于精原細胞睪丸癌、睪丸畸胎瘤等。肺癌、胰腺癌、胃癌、肝癌、乳腺癌等血清中的 HCG也會升高，因此將HCG看作癌癥標志物之一。同時需結合其它檢查結果進行綜合判斷。 產品信息Bioss提供HCG 檢測原料如下：點擊圖片查看大圖 性能評價膠體金平臺：1. HCG抗體對檢測標準品：Capture (Cat: V2702)- Detection (Cat: V2707)，在膠體金平臺上檢測標準品，濃度分別為100000、10000、1000、100、10、1、0mIU/mL的標準品，結果如下：圖1. 膠體金試紙條檢測標準品2.HCG抗體對檢測賦值血清樣本和尿液樣本：Capture (Cat: V2702) - Detection (Cat: V2707)，將孕期血清樣本分別稀釋至同一濃度100mIU/mL，非孕期尿樣1和尿樣2稀釋2倍，檢測結果如下：圖2. 膠體金試紙條檢測賦值血清3.HCG抗體對與LH的交叉反應：HCG抗體對Capture (Cat: V2702)- Detection (Cat: V2707)，將LH的不同定值血清樣本稀釋至同一濃度40mIU/mL，結果沒有交叉反應，檢測結果如下：圖3. HCG膠體金試紙條檢測LH血清 ELISA平臺： 1. 產品性能：采用HCG抗體對Capture (Cat: V2705)- Detection (Cat: V2707)、Capture (Cat: V2706)- Detection (Cat: V2707)建立ELISA標準曲線，相關系數R2＞0.99，線性范圍均為0.15-38.76mIU/mL，靈敏度為0.15mIU/mL。圖4. HCG標準曲線2. 一致性分析：采用HCG抗體對檢測羅氏賦值血清樣本(16例，濃度范圍12659-121242mIU/mL)，樣本符合率R2＞0.99。圖5. ELISA平臺樣本符合率 我們的優勢博奧森 (Bioss) 一直致力于HCG檢測抗原、抗體原料的研發，經過嚴格的篩選及驗證，現推出高靈敏度的HCG配對抗體，可用于早期妊娠、異常妊娠、流產及絨毛膜上皮癌等疾病的診斷。多種樣本檢測分析，結果穩定，產品一致性好；ELISA測試中，靈敏度可達0.15mIU/mL；抗體特異性好、靈敏度高、批間差異��；抗原純度高、穩定性好；適用于膠體金層析、酶免等平臺的應用。...
背景資料促黃體激素 (Luteinizing hormone，LH) 也叫黃體生成素、促間質細胞激素，是腺垂體前葉細胞分泌的一種糖蛋白類促性腺激素，由α和β兩條多肽組成的異源二聚體，存在于人的血液和尿液中。對于女性來說，LH與促卵泡刺激素 (FSH) 共同作用促進卵泡成熟與排卵，使卵泡破裂形成黃體，并分泌雌激素和孕激素。LH的產生受下丘腦促性腺釋放激素的控制，同時受卵巢的正、負反饋調控。對于男性來說，LH的作用是促進睪丸間質細胞的發育及**的分泌。男性LH的正常值為1.24-8.62mIU/mL；在女性不同的時期，LH的值存在差異。卵泡期LH的正常值為2.12-10.89mIU/mL，排卵期為19.18-103.03mIU/mL，黃體期為1.2-12.86mIU/mL，絕經期為10.87-58.64mIU/mL（檢測方法不同，測值會有所差異）。在女性正常的月經周期中，LH高峰值一經出現，預示著未來24-36小時內將會有成熟卵子排出，此時也意味著女性最佳受孕時機的到來。 臨床意義LH和FSH的共同作用維持著卵巢的月經周期，促使排卵與黃體的形成。LH值的偏高或偏低，都會影響到雌激素或雄激素的功能，從而導致女性不能正常排卵或男性性腺功能障礙等。(1)血清LH值偏高可見于多囊卵巢綜合征、卵巢發育不全、卵巢切除、絕經、更年期綜合征、中樞性性早熟、初期睪丸衰退以及曲細精管發育不全等疾病。(2)血清LH值偏低可見于腺垂體功能減退、黃體功能不全、下丘腦性閉經、不孕及月經失調等疾病。 產品信息Bioss提供LH 檢測原料如下： 點擊圖片查看大圖 性能評價膠體金平臺： 1. LH抗體對檢測標準品： Capture (Cat: V6401)- Detection (Cat: V6404)，在膠體金平臺上檢測標準品，濃度分別為200、20、2、0mIU/mL的標準品，結果如下：圖1. 膠體金試紙條檢測標準品 2.LH抗體對檢測賦值血清樣本和尿液樣本：Capture (Cat: V6401)- Detection (Cat: V6404)，將排卵期血清1和血清2稀釋至同一濃度40mIU/mL，卵泡期血清3和血清4稀釋2倍，卵泡期尿樣1和尿樣2稀釋2倍，結果顯示可明顯區分排卵期與卵泡期，結果如下：圖2. 膠體金試紙條檢測賦值血清 ELISA平臺： 1. 產品性能： 采用LH抗體對Capture (Cat: V6403)- Detection (Cat: V6404)建立ELISA標準曲線，相關系數R2＞0.99，線性范圍均為0.156-10mIU/mL，靈敏度為0.156mIU/mL。圖3. LH標準曲線 2. 一致性分析：采用LH抗體對檢測羅氏賦值血清樣本(19例，濃度范圍7.31-83.24mIU/mL)，樣本符合率R2＞0.98。圖4. ELISA平臺樣本符合率 我們的優勢博奧森 (Bioss) 一直致力于LH檢測抗原、抗體原料的研發，經過嚴格的篩選及驗證，現推出高靈敏度的LH配對抗體，用于監測女性排卵、診斷女性多囊卵巢綜合征和閉經綜合征、男性原發性或繼發性睪丸功能低下、兒童真性或假性早熟等疾病。多種樣本檢測分析，結果穩定，產品一致性好；ELISA測試中，靈敏度可達0.156mIU/mL；抗體特異性好、靈敏度高、批間差異��；抗原純度高、穩定性好；適用于膠體金層析、酶免等平臺的應用。 ...
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